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     Chem & Biol:开发出用以追踪癌细胞在机体中循环的新型荧光蛋白追踪技术


       癌症在机体扩散后寻找并且破坏循环在机体中的癌细胞对于癌症患者的生存至关重要,近日,刊登在国际杂志Chemistry & Biology上的一篇研究报告中,来自美国阿肯色大学的研究人员开发了一种新型技术,其可以帮助研究者标记循环在血液中的肿瘤细胞并且对其进行追踪,这将大大帮助研究者们理解癌症的扩散机制以及如何有效抑制癌细胞的扩散。        
癌细胞扩散或者癌症转移是引发90%以上癌症患者死亡的主要原因,当前科学家并没有有效的手段来干预及阻断肿瘤细胞的扩散,如今研究者开发了可对癌细胞进行标记且对其进行追踪的新技术。
       研究者利用图片切换式的荧光蛋白作为基础,其可以对光产生反应来不断改变颜色,当第一束激发光击中循环中的肿瘤细胞后,荧光蛋白就会表现出荧光绿,使用不同波长的第二束激发光将会使得肿瘤细胞变为荧光红,对于标记的单一细胞来讲,研究者可以利用非常细的紫色激光对较细血管中的肿瘤细胞进行标记追踪。        
来自每一个细胞的荧光最终都会被收集、检测,并且作为实时的信号追踪在电脑监控器上重现,这就使得研究者们可以对血液中的单一肿瘤细胞进行计数并且追踪。
      Galanzha博士表示,这种技术就可以实现对血液中数亿万个细胞中的一个循环的病变细胞进行标记。随后研究者利用肿瘤模式小鼠进行实验,实时监测小鼠机体中来自于原始肿瘤在血液中循环的癌细胞的动态学情况,研究者也可以对单一循环的癌细胞多种目的地进行成像,来揭示其循环的路径、定居的健康组织以及存在的转移位点等。
      这种新型技术将版主肿瘤学家开发出干预阻断癌细胞在血液中循环的新型疗法,从而为开发抑制肿瘤转移及治疗转移性癌症的疗法提供帮助和希望。(来源:生物谷Bioon.com)

doi:10.1016/j.chembiol.2014.03.012
In Vivo Photoswitchable Flow Cytometry for Direct Tracking of Single Circulating Tumor Cells
Dmitry A. Nedosekin,Vladislav V. Verkhusha,Alexander V. Melerzanov,Vladimir P. Zharov,Ekaterina I. Galanzha
Photoswitchable fluorescent proteins (PSFPs) that change their color in response to light have led to breakthroughs in studying static cells. However, using PSFPs to study cells in dynamic conditions is challenging. Here we introduce a method for in vivo ultrafast photoswitching of PSFPs that provides labeling and tracking of single circulating cells. Using in vivo multicolor flow cytometry, this method demonstrated the capability for studying recirculation, migration, and distribution of circulating tumor cells (CTCs) during metastasis progression. In tumor-bearing mice, it enabled monitoring of real-time dynamics of CTCs released from primary tumor, identifying dormant cells, and imaging of CTCs colonizing a primary tumor (self-seeding) or existing metastasis (reseeding). Integration of genetically encoded PSFPs, fast photoswitching, flow cytometry, and imaging makes in vivo single cell analysis in the circulation feasible to provide insights into the behavior of CTCs and potentially immune-related and bacterial cells in circulation.
 
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